【Principio del test 】
In questo kit, primer e sonde della tecnologia PCR fluorescente in tempo reale sono progettati rispettivamente per le regioni conservate e specifiche dei geni ORF1ab e N di 2019-nCoV. Durante l'amplificazione PCR, la sonda si lega al modello e il gruppo reporter all'estremità 5' della sonda viene scisso dall'enzima Taq (attività 5'→3' esonucleasi), allontanandosi così dal gruppo quench per generare un segnale fluorescente . La curva di amplificazione in tempo reale viene tracciata automaticamente in base al segnale di fluorescenza rilevato e viene calcolato il valore Ct del campione. I fluorofori FAM e HEX sono marcati con il gene ORF1ab e Nsonde genetiche nella soluzione di reazione 2019-nCoV-PCR. Utilizzando un test, è possibile eseguire simultaneamente il rilevamento qualitativo dei due geni sopra menzionati di 2019-nCoV. Il kit è dotato di un controllo interno (IC), che è un frammento del gene umano domestico, ed è etichettato con un gruppo fluorescente ROX.
Nota: i diversi lotti di componenti non possono essere scambiati.
【Condizioni di conservazione e data di scadenza 】
Il kit viene trasportato a temperatura ambiente.
Per una conservazione a lungo termine, il kit deve essere conservato al buio
-25℃~-15℃ ed è valido per 12 mesi.
Data di produzione e data di scadenza (vedi etichetta).
【Requisiti campione 】
- Campioni applicabili Tampone nasofaringeo
- Raccolta dei campioni Tampone nasofaringeo: le secrezioni nasofaringee sono state tamponate con tampone sterile e inserite nella provetta contenente la soluzione conservante.
- Manipolazione e conservazione dei campioni: i campioni utilizzati per il rilevamento degli acidi nucleici devono essere testati il prima possibile. Se i campioni possono essere testati entro 24 ore, potrebbero essere conservati a 2~8℃; i campioni devono essere conservati a -70℃ o a una temperatura inferiore (se non è prevista una condizione di conservazione a -70℃, devono essere temporaneamente conservati a -20℃). Durante il trasporto del campione devono essere evitati congelamenti e scongelamenti ripetuti.
【Metodo di prova 】
Estrazione dell'acido nucleico
1.1 Controllo negativo per l'estrazione manuale dell'acido nucleico, aggiungere lo stesso volume di reagente di estrazione e purificazione dell'acido nucleico campione alla provetta (reagente di estrazione e purificazione del campione e dell'acido nucleico 1:1 per l'estrazione). Reazioni PCR per l'amplificazione dell'acido nucleico.
1.2 Estrazione meccanica dell'acido nucleico:
Questo kit è compatibile con qualsiasi altro kit commerciale. Per altri kit commerciali di estrazione degli acidi nucleici, seguire le istruzioni.
Preparazione e caricamento del sistema
Quando si inizia a utilizzare la soluzione di reazione 2019-nCoV-PCR e la miscela di enzimi RT-PCR, aggiungere la reidratazione (acqua purificata sterilizzata) 1250 μL/provetta e 250 μL/provetta per scioglierli rispettivamente. Questa operazione viene eseguita mediante vortex per 20 secondi, seguita da una breve rotazione. Preparazione della miscela 2019-nCoV-RT-PCR: prendere n×25 μL di soluzione di reazione 2019-nCoV-PCR e n×5 μL di miscela enzimatica (n come numero di provette di reazione), miscela e centrifuga. E ciascuna provetta è stata dispensata in una quantità di 30μL in una provetta per PCR adatta per un apparecchio per PCR a fluorescenza. 20μL di controllo negativo, l'acido nucleico del campione estratto e il controllo positivo 2019-nCoV-PCR vengono aggiunti ai sistemi di reazione e il volume totale della reazione è 50μL. Fissare il coperchio della provetta e spostarlo nell'area del test di amplificazione dopo alcuni secondi di miscelazione vortex e centrifugazione.
NOTA: il reagente rimanente deve essere conservato a una temperatura inferiore a -15 ℃ ~ -25 ℃, congelato e scongelato ripetutamente per non più di 5 volte. Utilizzare immediatamente dopo aver miscelato la soluzione di reazione 2019-nCoV-PCR e la miscela di enzimi RT-PCR. Scartare l'eccesso.
Chi siamo
FAQ
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Sì, siamo il produttore diretto della fabbrica che possiede linee di produzione e lavoratori. Tutto è flessibile e non ti preoccupare di cambiare denaro extra da parte dell'intermediario o del commerciante.
2. Puoi realizzare il nostro design?
Sì, i tuoi disegni/schizzi/immagini sono accoglienti.
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